【寧夏大學新聞中心訊 生命與食品學部】牛皰疹病毒1型(BHV-1)是一種對全球養牛業危害極大的高傳染性病毒,可引發牛的呼吸道和生殖系統多種疾病,導致巨大的經濟損失。因此,牛皰疹病毒1型的快速、準確檢測對于該病的預防和控制尤為重要。近日,我校生命科學學院王玉炯、李勇、郭慧琛團隊在中國科學院1區top期刊《International Journal of Biological Macromolecules》(2025 IF: 7.7)發表了題為“Double antibody sandwich ELISA based on rabbit monoclonal antibody targeting gD protein for the detection of bovine herpesvirus 1”的研究論文,成功構建了一種基于兔單抗的雙抗體夾心ELISA檢測方法,為牛皰疹病毒1型的精準檢測提供了新的工具。

該研究以牛皰疹病毒1型的gD蛋白為靶點,構建了一個容量為7.14×1010cfu/mL的兔源單鏈片段變量(scFv)噬菌體展示庫。通過三輪生物淘選,獲得了三種高親和力的scFv,并利用CHO-K1細胞表達出三種高親和力的兔單克隆抗體?;贒3為捕獲抗體、D2為檢測抗體,成功建立了雙抗體夾心ELISA方法。實驗結果顯示,在3% BSA封閉、抗原孵育90分鐘、顯色15分鐘的條件下,該方法對牛皰疹病毒1型具有良好的特異性和穩定性,與其他牛相關病毒無交叉反應。同時,該方法的批內和批間變異系數均低于5%,具有良好的穩定性和可靠性。

該研究首次將兔單抗應用于牛皰疹病毒1型的檢測方法開發,相較于傳統的鼠源單抗和兔單抗具有更高的特異性和親和力,能夠有效提高檢測的靈敏度和準確性。這一成果不僅為牛皰疹病毒1型的流行病學監測和預防提供了重要的技術支持,也為病毒相關診斷試劑的研發提供了新的思路和方法。該方法的建立為寧夏奶牛和肉牛產業的疾病防控和健康養殖提供了重要的技術支撐。
該研究得到了國家自然科學基金項目和寧夏回族自治區重點研發計劃項目的資助。我校西部特色生物資源保護與利用教育部重點實驗室博士研究生劉強是本研究論文的第一作者,生命科學學院王玉炯、李勇,郭慧琛為共同通訊作者。
原文鏈接:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39929469/
(編輯:王文娣)